在我們免疫比濁試劑開發過程中，你們有沒有遇到這樣的問題：“高值區分度比較大時，低端就區分不開；高端區分度比較大不開時，低端卻區分的比較明顯”今天帶著這個問題和大家探討一下聚乙二醇(PEG)對免(mian)疫比(bi)濁試劑是如何影響的。

在標記微球和樣本反應時，我們需要提前準備好反應環境，這里的反應環境就是我們通常說的R1試劑，沒有R1試劑的參與，整個反應將會一塌糊涂，或者說根本不行！

在R1試劑中主要包括這幾個部分，包括緩沖液、離子、防腐劑、穩定劑、PEG,有的時間也會添加阻斷劑在里面，PEG在這里面起著關鍵作用，用量的多少直接影響著抗原抗體反應的成敗！PEG無毒、無刺激性，具有良好的水溶性，并與許多有機物組份有良好的相溶性。它們具有優良的潤滑性、保濕性、分散性、粘接劑、抗(kang)靜電劑及柔軟劑等，它在免疫(yi)比濁法中對(dui)抗原(yuan)抗體反(fan)應有顯著影響，主要體現在以下幾(ji)個方面：

1、增加試劑靈敏

PEG可以加快反應速度，穩定抗原-抗體復合物。在反應體系中加入適量的PEG（通常濃度為3% ~ 4%），可以提高檢測信號的強度和靈敏度。PEG能夠增加某些抗原的溶解性，從而促進抗原與抗體之間的結合，增強免疫反應的靈敏度。PEG可以用于將多個抗原連接在一起，形成多價結構，從而增強特異性和親和力，促進更強烈的免疫反應。PEG修飾的(de)抗原或(huo)抗體(ti)往往具有更(geng)好的(de)穩定(ding)性，這對于(yu)長期儲存或(huo)在復雜生物(wu)環境中檢測時尤為重要。

這里要特別注意：當濃(nong)度非常(chang)低時(shi)，不同濃(nong)度的校準(zhun)品將檢測(ce)出的光電值幾乎(hu)一樣；濃度升高時，不同濃度的校準品將檢測出的光電值有所不同(這時候高端區分比較明顯，低端區分不太明顯）；隨著濃度越來越高，高端區(qu)(qu)分慢(man)慢(man)變得(de)不明(ming)顯比較明(ming)，而(er)低端區(qu)(qu)分變的比較明(ming)顯。

2、防止非特異性沉淀

通常PEG的分子量較大，可以有效防止血清、血漿中其他蛋白質（如IgM、α2巨球蛋白、脂蛋白）非特異性沉淀，避免形成“偽濁度”，影響準確性和空白限。PEG的空間位阻效(xiao)應可以減少抗體與其他大分子或細胞表面的非特異性結合，提高信號的特異性和準確性。

3、維持抗體過量

在抗原過量的情況下，PEG可以促進抗原-抗體復合物的形成，避免光散射減少，從而保持較高的濁度。

適用的pH值范圍：

PEG的使用需要(yao)確保反應液的pH值(zhi)在6.5~8.5之(zhi)間(jian)，以形成(cheng)穩定的復(fu)合物(wu)。

操作注意事項：

在使用PEG時，需要注意其濃度不宜過(guo)高(gao)，否(fou)則可能會導致非特異性聚(ju)集和微球自身凝聚(ju)，影響測(ce)定結果的準(zhun)確性。

總結來說(shuo)，PEG通過增快反應速度、穩定(ding)復合物、防止非特異性(xing)(xing)沉(chen)淀等(deng)方式，顯著提高(gao)了(le)免疫比濁法測定(ding)的靈敏度和(he)準確性(xing)(xing)。但在使(shi)用時需(xu)要(yao)嚴(yan)格控制PEG的濃度和(he)操作(zuo)條件，以避免不良影響。